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PCR實(shí)驗(yàn)室控制防止污染環(huán)境的方法:
一、根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)設(shè)定區(qū)域空氣壓力。選擇全送全排的空調(diào)機(jī)機(jī)組,設(shè)置有效的中央空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng),根據(jù)不同工作區(qū)域?qū)諝鈮毫Φ囊?正壓或負(fù)壓環(huán)境),嚴(yán)格保證規(guī)定的空氣壓力。
二、嚴(yán)格劃分工作區(qū)域。實(shí)驗(yàn)區(qū)應(yīng)科學(xué)劃分,每一實(shí)驗(yàn)區(qū)應(yīng)有明顯的標(biāo)志(例如醒目的標(biāo)牌或不同的地面色調(diào)),以防止機(jī)器設(shè)備、實(shí)驗(yàn)試劑在不同實(shí)驗(yàn)區(qū)產(chǎn)生混淆。
三、健全完善實(shí)驗(yàn)室服務(wù)設(shè)施。為保證實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行,實(shí)驗(yàn)室設(shè)施應(yīng)盡可能完善,并根據(jù)實(shí)驗(yàn)的具體內(nèi)容配置不同的儀器設(shè)備,如凈化臺(tái)、離心機(jī)、加樣器等。
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PCR實(shí)驗(yàn)室為什么要進(jìn)行三區(qū)隔離?常見(jiàn)的三區(qū)是指:
1、試劑配制區(qū):PCR反應(yīng)體系的配制區(qū)域。
2、標(biāo)本處理區(qū):包括擴(kuò)增模板的制備,即提取DNA的地方。
3、PCR擴(kuò)增和產(chǎn)物分析區(qū):進(jìn)行PCR擴(kuò)增的區(qū)域,山西PCR實(shí)驗(yàn)室工程廠家,也是擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行凝膠電泳分析的區(qū)域。
如果將PCR擴(kuò)增區(qū)域和產(chǎn)物分析區(qū)再次分開(kāi),就是四區(qū)隔離。四區(qū)隔離,主要目的是防止氣溶膠在各個(gè)PCR區(qū)域之間的流動(dòng),好的方法是每個(gè)區(qū)域隔一幢樓,但操作起來(lái)不現(xiàn)實(shí),于是便有了針對(duì)不同區(qū)域設(shè)置正負(fù)壓的方法。
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PCR實(shí)驗(yàn)室為什么要進(jìn)行三區(qū)隔離?
試劑配制區(qū)(Ⅰ區(qū)):潔凈的區(qū)域,保持微正壓使得外界空氣無(wú)法進(jìn)入隔離污染源。并且陰性模板應(yīng)該在此區(qū)加入PCR管并蓋蓋,嚴(yán)禁在此區(qū)域打開(kāi)、存放裝有DNA模板的離心管。
DNA模板添加區(qū)(Ⅱ區(qū)):壓力比Ⅰ區(qū)低,保證內(nèi)部空氣不外泄,以免陽(yáng)性模板的氣溶膠對(duì)外界環(huán)境造成污染。
擴(kuò)增及PCR產(chǎn)物分析區(qū)(Ⅲ區(qū)):保持負(fù)壓,使得內(nèi)部空氣不外泄,以免擴(kuò)增產(chǎn)物的氣溶膠對(duì)外界環(huán)境造成污染。操作時(shí)壓力遵循Ⅰ區(qū)→Ⅱ區(qū)→Ⅲ區(qū)單一方向進(jìn)行,不可逆向進(jìn)行。
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